Estandarización de las condiciones de un ensayo de oligonucleótidos ligados a enzimas (ELONA) para la detección de la proteína ROP18 de Toxoplasma gondii en suero de individuos con toxoplasmosis

Vargas Montes, Mónica

dc.contributor.advisor	Universidad del Quindío - Colombia - Director - Néstor Iván Cardona Perez, M.Sc. Dr. Sc.	spa
dc.contributor.author	Vargas Montes, Mónica	spa
dc.date.accessioned	2017-12-04T19:21:20Z	spa
dc.date.available	2017-12-04T19:21:20Z	spa
dc.date.issued	2017-06-30	spa
dc.identifier.uri	https://bdigital.uniquindio.edu.co/handle/001/3452	spa
dc.description.abstract	La proteína ROP18 es uno de los principales factores de virulencia del parásito Toxoplasma gondii que contribuye con el fenotipo agudo de la infección en modelo murino. Hasta el momento, no se ha realizado la identificación de esta proteína en suero de personas con toxoplasmosis y no se conoce si podría relacionarse con la manifestación clínica de la enfermedad. El objetivo del estudio fue estandarizar las condiciones de un Ensayo de Oligonucleótidos Ligados a Enzimas (ELONA-Enzyme Linked Oligonucleotide Assay) con los aptámeros de ADN 2039 y 2056 para la detección de la proteína ROP18 en suero de personas con toxoplasmosis.	spa
dc.description.tableofcontents	1. INTRODUCCIÓN 9 2. OBJETIVOS 13 2.1. Objetivo general 13 2.2. Objetivos específicos 13 3. ANTECEDENTES Y MARCO TEÓRICO 14 3.1. Generalidades de la biología de Toxoplasma gondii 14 3.2. Toxoplasmosis: transmisión y fisiopatología de la enfermedad 15 3.3. Respuesta inmune contra T. gondii 16 3.4. ROP quinasas de T. gondii: ROP18 17 3.5. Biomarcadores 19 3.6. Inmunoensayos: ELISA y ELONA 21 4. MATERIALES Y MÉTODOS 23 4.1 Estandarización del ensayo ELONA 24 4.1.1 Antígenos y moléculas de captura 24 4.1.2 Configuraciones evaluadas para la estandarización del ELONA 25 4.1.3 Condiciones a estandarizar en el ELONA directo 26 4.1.4 Condiciones a estandarizar en el ELONA tipo sándwich 30 4.2 Análisis in silico de los aptámeros anti-ROP18 32 4.2.1 Predicción de la estructura secundaria 32 4.2.2 Predicción de motivos y modelamiento tridimensional 32 4.2.3 Análisis de acoplamiento molecular de los aptámeros con ROP18 y otras proteínas control (PAK-1, MAPK-12 y ROP16) 33 4.3. Detección de la proteína ROP18 en la población de estudio 35 4.4. Análisis estadísticos 36 5. RESULTADOS 38 5.1. Estandarización del ensayo ELONA 38 5.1.1 Condiciones estandarizadas en el ELONA directo 38 5.1.2 Condiciones estandarizadas en el ELONA tipo sándwich: 49 5.2. Análisis in silico de los aptámeros anti-ROP18 52 5.2.1. Predicción de la estructura secundaria 53 5.2.2 Predicción de motivos y modelamiento tridimensional 54 5.2.3 Análisis de acoplamiento molecular de los aptámeros con ROP18 y otras proteínas control (PAK-1, MAPK-12 y ROP16) 58 5.3. Detección de la proteína ROP18 en la población de estudio 59 5.3.1 Descripción de asociaciones entre el ELONA-ROP18 positivo y las formas clínicas de toxoplasmosis 60 6. DISCUSIÓN 64 7. CONCLUSIONES 78 8. ASPECTOS BIOÉTICOS DE LA INVESTIGACIÓN 79	spa
dc.format.mimetype	application/pdf	spa
dc.language.iso	spa	spa
dc.rights	Derechos Reservados - Universidad del Quindío	spa
dc.rights.uri	https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/	spa
dc.title	Estandarización de las condiciones de un ensayo de oligonucleótidos ligados a enzimas (ELONA) para la detección de la proteína ROP18 de Toxoplasma gondii en suero de individuos con toxoplasmosis	spa
dc.type	Trabajo de grado - Maestría	spa
dc.rights.accessrights	info:eu-repo/semantics/closedAccess	spa
dc.rights.creativecommons	Atribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0)	spa
dc.subject.proposal	Toxoplasma gondii	spa
dc.subject.proposal	proteína ROP 18	spa
dc.subject.proposal	ELONA	spa
dc.subject.proposal	aptameros	spa
dc.type.coar	http://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc	spa
dc.type.driver	info:eu-repo/semantics/masterThesis	spa
dc.type.version	info:eu-repo/semantics/submittedVersion	spa
dc.description.degreelevel	Maestría	spa
dc.description.degreename	Magíster en Ciencias Biomédicas	spa
dc.publisher.faculty	Ciencias de la Salud - Maestría en Ciencias Biomédicas	spa
dc.type.content	Text	spa
dc.type.redcol	https://purl.org/redcol/resource_type/TM	spa
dc.type.coarversion	http://purl.org/coar/version/c_71e4c1898caa6e32	spa
dc.rights.coar	http://purl.org/coar/access_right/c_14cb	spa